Evaluación de la respuesta serológica postvacunación de perros inoculados con diferentes bacterinas comerciales contra Leptospira interrogans

La leptospirosis se caracteriza por una respuesta mediada por aglutininas, IgM e IgG, detectables por el test de aglutinación microscópica (MAT). Las vacunas pueden estimular la producción de títulos bajos detectables. El objetivo fue: determinar mediante la MAT los títulos de aglutininas originados contra Leptospira interrogans en perros, durante un periodo de 90 días posterior a la vacunación con dos bacterinas comerciales. Se realizó un estudio observacional descriptivo en dos grupos de caninos del sur de Santa Fe, de diferentes razas, edades y sexos. Se analizaron sueros sanguíneos de un grupo de 15 (grupo 1) y otro conformado por 20 (grupo 2). No habían recibido vacunas. Los seronegativos fueron vacunados de forma subcutánea, con dos dosis de una bacterina comercial bivalente conteniendo: L. interrogans Icterohaemorrhagiae y L. interrogans Canicola. Se emplearon diferentes bacterinas para cada grupo. Se extrajeron muestras, a los 15, 30 y 90 días postvacunación. En el grupo 1, a los 15 días, se hallaron 6 serorreactivos, 4 a Canicola 1:100, 1 a Icterohaemorrhagiae 1:200, el restante coaglutinó. A los 30 días, se observaron 15 serorreactivos, 2 a Icterohaemorrhagiae 1:200 - 1:400 y 4 a Canicola 1:100 a 1:200, los 9 restantes coaglutinaron. En el grupo 2, a los 15 días postvacunación, se hallaron 18 con coaglutinaciones, 1:100 a 1:400 y 1 con 1:400 a Icterohaemorrhagiae. A los 30, 16 serorreactivos, 5 a un serovar y 11 coaglutinantes, 1:100 o 1:200. A los 90 días, en ambos grupos, solamente 1 permaneció serorreactivo con 1:100/1:200 a Icterohaemorrhagiae respectivamente.

Se realizó un estudio observacional descriptivo que abarcó dos grupos de caninos (Canis lupus familiaris). En el grupo 1, se analizaron muestras de suero sanguíneo de 16 perros y en el 2, de 20. Los caninos de diferentes edades, sexo y razas, provenientes de localidades del sur de Santa Fe, Argentina, pertenecían a propietarios, los cuales proporcionaron su consentimiento informado, aprobado por el Comité de Ética de la Investigación de la Facultad de Ciencias Veterinarias, UNR. Los animales no habían recibido vacunas contra leptospirosis. En cada grupo del estudio, se obtuvo de cada canino una muestra de sangre mediante punción de la vena safena, se separó el suero y se analizó mediante la MAT. Los que resultaron seronegativos fueron vacunados de forma subcutánea, empleando un esquema de vacunación de dos dosis de una bacterina bivalente contra L. interrogans, conteniendo los serovares: L. interrogans Icterohaemorrhagiae y L. interrogans Canicola. El intervalo entre las dosis fue de 21 días. Cada grupo recibió una vacuna comercial contra Leptospira spp., de formulación similar pero de diferente laboratorio. Posteriormente a la aplicación de la segunda dosis (refuerzo), se extrajeron muestras de sangre, a los 15, 30 y 90 días postvacunación. Mientras duraron los ensayos, los caninos fueron controlados por sus propietarios, ninguno padeció una enfermedad clínica. Los sueros sanguíneos se analizaron mediante la MAT, ensayando las cepas de referencia de los serovares de Leptospira spp.: Leptospira interrogans: Pomona Pomona; Icterohaemorrhagiae Copenhageni M 20; Canicola Canicola Hond Utrech IV; Pyrogenes Pyrogenes Salinem; L. kirschneri: Grippotyphosa Moskva V y L. borgpetersenii: Ballum Castellonis Castellón 3. La dilución empleada como punto de corte fue de 1:100.

En el grupo 1 (16 caninos), en el análisis serológico previo a la vacunación, se detectó un serorreactivo, por lo que se continuó el ensayo con 15 animales. A los 15 días postvacunación, se hallaron 6 serorreactivos, 4 reaccionaron a Canicola con títulos de 1:100, 1 a Icterohaemorrhagiae con 1:200 y el restante coaglutinó con ambos serovares vacunales, el título más alto fue de 1:200 a Canicola. A los 30 días, se observaron 15 perros serorreactivos, 2 a Icterohaemorrhagiae con 1:400 y 1:200 y 4 a Canicola con 1:100 a 1:200, los 9 restantes presentaron reacciones cruzadas entre ambos serovares con títulos de 1:100 a 1:200 y en el suero del perro que a los 15 días presentó coaglutinación, se observó que mantuvo esa condición, pero que el título a Canicola ascendió a 1:1600. A los 90 días postvacunación, 1 permaneció serorreactivo a Icterohaemorragiae con un título de 1:100 (Tabla 1). Se pudo observar que 3 caninos permanecieron seronegativos durante todo el ensayo. En el grupo 2 (20 caninos), en el análisis previo no se detectó ningún serorreactivo. A los 15 días postvacunación, se hallaron 19 serorreactivos, 18 presentaron coaglutinación con los serovares contenidos en la vacuna, con títulos de 1:100 a 1:400 y 1 serorreactivo a Icterohaemorrhagiae con 1:400. A los 30 días, se hallaron 16 sueros reactivos, 11 coaglutinantes y 5 a uno de los serovares, con títulos de 1:100 o 1:200, incluidos, el seronegativo y el que dio 1:400 a Icterohaemorrhagiae a los 15 días, que modificaron su estatus. Solamente 4 mantuvieron un título de 1:200 para alguno de los serovares vacunales y 4 se negativizaron. A los 90 días, 1 continuó presentando un título de 1:200 a Icterohaemorrhagiae (Tabla 2). En ninguno de los ensayos realizados se observaron reacciones cruzadas con los serovares de Leptospira spp. incluidos en el estudio.

c= coaglutinantes; * Suero en el que se observó seroconversión a los 30 días postvacunación.

c= coaglutinantes.

La leptospirosis es una enfermedad infecciosa zoonótica que reviste carácter endémico en Argentina. Es causada por especies patógenas del género Leptospira, que abarcan una gran cantidad de serovares, que infectan a los animales y a los humanos.

Los perros se pueden infectar por contacto directo con orina de animales infectados o indirectamente por medio de agua y alimentos contaminados^1-3. Sufren una colonización de los túbulos renales por las leptospiras, que son excretadas en la orina durante meses, constituyendo un factor de riesgo potencial en la transmisión de la enfermedad^3,4. Los perros infectados pueden padecer la enfermedad con una gravedad variable, dependiendo de la cepa infectante y la respuesta inmune desarrollada^5,6,7.

En el sur de la provincia de Santa Fe, en los últimos años, se ha podido observar una mayor frecuencia de detección de serovares de los serogrupos Canicola e Icterohaemorrhagiae en perros con leptospirosis clínica, seropositivos a la MAT⁷. Por esta razón, las vacunas que se emplean para la prevención de la enfermedad son bacterinas bivalentes formuladas con esos serovares, que generan una protección específica^1,8. La leptospirosis, se caracteriza por una rápida respuesta mediada por anticuerpos aglutinantes de tipo IgM e IgG, que pueden ser detectados por la MAT, considerada la técnica diagnóstica de referencia internacional^2,4,7. Para un diagnóstico serológico correcto mediante esta prueba, es importante evaluar la seroconversión en muestras pareadas de suero sanguíneo (aumento del cuádruple en el título de anticuerpos obtenido en la segunda muestra)^1,2,7,9. Existen casos de caninos vacunados, en los que se observan resultados de títulos pareados que no superan el 1/200 para Canicola e Icterohaemorrhagiae, en dichos casos, una correcta anamnesis durante el examen clínico, podría sugerir que esos títulos bajos corresponderían a anticuerpos postvacunales. Ha sido reportado, que las vacunas contra leptospirosis pueden estimular la producción de títulos bajos de aglutininas IgM e IgG en un período de tiempo relativamente corto posterior a la vacunación^3,10-12. El objetivo de este trabajo fue: determinar mediante la MAT los títulos de aglutininas originados postvacunación contra Leptospira interrogans en perros, durante un periodo de 90 días posterior a la vacunación con dos bacterinas comerciales.

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